有两种方法来测定。
第一种用菲林试剂来测定，原理为：
CH2OH（CHOH）4CHO+2[Ag(NH3）2OH]（水浴加热）→CH2OH（CHOH）4COONH4+2Ag↓+3NH3+H2O
注意事项：⑴ 试管内壁必须洁净
⑵ 银氨溶液随用随配不可久置
⑶ 水浴加热，不可用酒精灯直接加热
⑷ 可加入氢氧化钠，以促进反应进行
⑸ 银镜可用稀HNO3浸泡洗涤除去。
加热还原生成的银附着在试管壁上，形成银镜，所以，这个反应也叫银镜反应。
第二种用新制的氢氧化铜溶液来测定，原理为：
葡萄糖溶液与新制氢氧化铜悬浊液反应生成砖红色沉淀。（浓度高时生成黄色沉淀）
CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加热→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O
注意事项：⑴ 新制2Cu(OH)2悬浊液要随用随配、不可久置。
⑵ 配制新制Cu(OH)2悬浊液时，所用NaOH溶液必须过量。
⑶ 反应液必须直接加热至沸腾。
⑷ 葡萄糖分子中虽然含有醛基，但是d-葡萄糖中不含有醛基。
葡萄糖是自然界分布最广且最为重要的一种单糖，它是一种多羟基醛。
纯净的葡萄糖为无色晶体，有甜味但甜味不如蔗糖（一般人无法尝到甜味），易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。天然葡萄糖水溶液旋光向右，故属于“右旋糖。
葡萄糖在生物学领域具有重要地位，是活细胞的能量来源和新陈代谢中间产物，即生物的主要供能物质。植物可通过光合作用产生葡萄糖。在糖果制造业和医药领域有着广泛应用。
化学性质
它是自然界分布最广泛的单糖。葡萄糖含五个羟基，一个醛基，具有多元醇和醛的性质。
用途：
生物培养基。金属还原剂。滴定硼酸的络合物形成剂。微量分析。测定全血葡萄糖。可直接被人体吸收。
正常人体每分钟利用葡萄糖的能力为每公斤体重6毫克。是一种能直接吸收利用，补充热能的碳水化合物，是人体所需能量的主要来源，在体内被氧化成二氧化碳和水，并同时供给热量，或以糖原形式贮存。能促进肝脏的解毒功能，对肝脏有保护作用。是生物体内最为常见的能源物资。
