(1)邻甲苯胺法:葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热,葡萄糖的醛基与邻甲苯胺缩合成葡萄糖基胺,后者脱水生成席夫氏(Schiff)碱,再经结构重排列,生成有色化合物,吸收峰在630nm。本法操作简单,无须制备血滤液,血液中基本上无其他物质干扰本法。
(2)葡萄糖氧化酶法:葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生一分子过氧化氢。在过氧化物酶和色原性氧受体(如联太茴香胺、4-氨基安替匹林偶联酚)的存在下,过氧化氢分解,释放出初生态氧,氧化色素原,生成有色化合物。此法特异性高,操作简便,结果可靠,但较难获得实用的酶。
(3)血清葡萄糖己糖激酶法:在己糖激酶催化下,葡萄糖和ATP发生磷酸化反应,生成葡萄糖-6-磷酸与ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下脱氢,生成6-磷酸葡萄糖酸,同时使NADP还原成NADPH。NADPH的生成速率与葡萄糖浓度成正比,在波长340nm下监测吸光度升高速率,计算出血清中葡萄糖浓度。此法的特异性比萄糖氧化酶法更高,是目前公认的测定血糖的参考方法。