果蔬中过氧化物酶活性测定方法详解
本实验旨在理解过氧化物酶的作用，并掌握愈创木酚法测定果蔬组织中POD活性的详细步骤。POD，即过氧化物酶，是果蔬体内一种关键的氧化还原酶，它与生物过程紧密相连，如生长、发育、抗病、抗氧化等。
过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质，产生有色化合物。在愈创木酚法中，POD催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4-邻甲氧基苯酚，其470 nm处有高光吸收，因此可利用比色法测量其活性。
实验所需材料包括各种果蔬，以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器，以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。具体制备过程中，需先制备酶液，通过研磨果蔬并离心提取酶提取液，然后进行活性测定，通过在特定波长下测定吸光度变化，计算出每分钟吸光度变化值，以此确定过氧化物酶的活性。
实验结果通过表格记录，并根据反应速率和样品重量计算酶活性。同时，要留意注意事项，如预实验以确保线性反应阶段，以及选择合适的提取液（如磷酸缓冲液）以提高酶提取效率。提取缓冲液中的添加剂如PEG、PVPP和Triton X-100有助于保护酶活性。
