食品中亚硝酸盐的测定是食品安全领域的重要内容。其中,光度法作为一种经典且广泛应用的测定手段,占据着不可或缺的地位。目前,基于光度法的亚硝酸盐测定方法多样,除了传统的格里斯试剂比色法及其衍生改良方法外,还包括催化(褪色)光度法、流动注射一分光光度法、顺序注射一分光光度法、导数光度法等。
分光光度法根据使用的波长不同,主要分为可见分光光度法、紫外分光光度法和红外分光光度法三种。我国的相关标准《食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》(GB 5009.33—2016)取代了旧版标准,包括GB5009.33—2010《食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》、NY/T1375—2007《植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定 离子色谱法》、NY/T1279—2007《蔬菜、水果中硝酸盐的测定 紫外分光光度法》、SN/T3151—2012《出口食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定 离子色谱法》。
这些标准规定了食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定方法,并适用于各类食品中这两种盐的测定。测定原理是,首先采用盐酸萘乙二胺法对亚硝酸盐进行测定,然后使用镉柱还原法对硝酸盐进行测定。具体操作包括:对试样中的蛋白质进行沉淀、脂肪进行去除,然后在弱酸条件下,使亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料。通过外标法测定亚硝酸盐含量。对于硝酸盐的测定,则是通过镉柱将硝酸盐还原为亚硝酸盐,进而测定亚硝酸盐的总量,最后通过总量减去试样中原有的亚硝酸盐含量,计算得到试样中的硝酸盐含量。