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用什么提取色素并测定叶绿素含量

有货之家 有货之家 发表于2024-11-13 22:58:54 浏览780 评论0

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一般用95%的酒精和80%丙酮提取,或用酒精、丙酮和水的混合液提取色素并测定叶绿素含量。

用什么提取色素并测定叶绿素含量

一、测定原理

根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常数。

二、材料、仪器设备及试剂

1、材料:新鲜(或烘干)的植物叶片。

2、仪器设备:分光光度计电子顶载天平(感量0.01g)研钵棕色容量瓶小漏斗定量滤纸吸水纸擦境纸滴管。

3、试剂:96%乙醇(或80%丙酮)石英砂碳酸钙粉。

三、实验步骤

1、取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉),混匀。

2、称取剪碎的新鲜样品0.2g,共3份,分别放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及2~3ml95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10ml,继续研磨至组织变白。静置3~5min。

3、取滤纸1张,置漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,过滤到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中。

4、用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至25ml,摇匀。

5、把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95%乙醇为空白,在波长665nm、649nm下测定吸光度。