内毒素测定主要依据浊度法和显色基质法的原理进行。浊度法是通过检测鲎试剂与内毒素反应过程中产生的浊度变化来测定内毒素含量。具体分为终点浊度法和动态浊度法,但前者尚未商业化,后者则是测量反应混合物达到预设吸光度所需的时间或浊度上升速率。
显色基质法则利用鲎试剂与内毒素反应生成的凝固酶促使特定底物显色,通过颜色深浅判断内毒素浓度,这种方法也称作比色法。对于只需要确定样品内毒素限量的情况,可以选择使用凝胶法鲎试剂,通过干扰试验来确定试剂的灵敏度。
对于定量测定样品中内毒素含量的需求,显色基质鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂是更合适的选择。动态浊度法和动态显色法需要配合带温育系统的动态光度测定仪器以及相应的软件而终点显色法则需用酶标仪或可见分光光度计进行检测,同时需要带有温育系统的酶标仪进行操作。
扩展资料
细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖(LipopolySaccharide,LPS)和蛋白的复合物,当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。内毒素大量进入血液就会引起发热反应—“热原反应。内毒素与多种感染疾病密切相关,病情恶化往往伴随着内毒素含量的增加,病情缓解也常伴随着内毒素含量的减少。因此,快速检测(1小时)血液、脏器内毒素含量可以为临床相关疾病的诊断预后提供参考。