植物中硝酸盐含量的测定注意事项
一、试剂准备
1. 硝态氮（NO3--N）标准溶液（500μg N/mL）：准确称取0.7221克烘干至恒质量的KNO3，溶解于去离子水中，定容至200毫升。
2. 5%水杨酸-硫酸溶液：称取5克水杨酸，溶于100毫升浓硫酸（相对密度1.84），搅拌均匀后，存于棕色瓶中，置于冰箱中，有效期一周。
3. 8%氢氧化钠溶液：称取20克氢氧化钠，溶于250毫升去离子水中。
二、实验步骤
1. 标准曲线制作
(1) 分别吸取1毫升、2毫升、4毫升、6毫升、8毫升、10毫升和12毫升的NO3--N标准溶液，置于50毫升容量瓶中，用去离子水定容至刻度，制成不同浓度的标准溶液。
(2) 取上述标准溶液0.1毫升，加入刻度试管中，以去离子水0.1毫升作为空白对照。加入0.4毫升5%水杨酸-硫酸溶液，摇匀，室温下放置20分钟后，加入8%氢氧化钠溶液9.5毫升，再次摇匀，待冷却至室温。
(3) 以空白对照为参比，于410纳米波长下测定吸光度。绘制NO3--N浓度与吸光度的标准曲线，并计算回归方程。
2. 样品中硝酸盐的测定
(1) 样品处理：取一定量的植物材料，剪碎混匀。精确称取2至3克样品，分为三份，加入10毫升去离子水，用玻璃珠封口，沸水浴中提取30分钟后取出，自来水冷却，过滤至25毫升容量瓶中，定容至刻度。
(2) 样品测定：取样品液0.1毫升，加入刻度试管中，加入0.4毫升5%水杨酸-硫酸溶液，混匀后室温下放置20分钟，再缓慢加入9.5毫升8%氢氧化钠溶液，待冷却至室温后，以空白对照为参比，于410纳米波长下测定吸光度。
三、结果计算
样品硝酸盐含量（μg/g）= x × VT / (W × VS)
其中：x 为由回归方程计算出的NO3--N浓度（μg/mL）VT 为样品定容体积（毫升）W 为样品质量（克）VS 为测定时取用的样品提取液体积（毫升）。
