硝酸还原酶活性的测定
原理
硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中关键性酶,与作物吸收和利用氮
简单易行,在一般条件下都能做到。
红色的偶氮染料。反应液的酸度大则增加重氮化作用的速度,但降低偶联作用的速度,颜色比较稳定。增加温度可以增加反应速度,但降低重氮盐的稳定度,所以反应需要在相同条件下进行。这种方法非常灵敏,能测定每ml含0.5μg的NaNO2。
仪器药品
721型分光光度计 真空泵(或注射器)
保温箱 天平
真空干燥器 钻孔器
三角烧瓶 移液管
烧杯
0.1mol/L磷酸缓冲液,pH7.5(见附表2)。
0.2mol/L KNO3:溶解20.22g KNO3于1000ml蒸馏水中。
磺胺试剂:1g磺胺加25ml浓盐酸,用蒸馏水稀释至100ml。
α—萘胺试剂:0.2gα—萘胺溶于含1ml浓盐酸的蒸馏水中,稀释至100ml。
NaNO2标准溶液:1g NaNO2用蒸馏水溶解成1000ml。然后吸取5ml,再加蒸馏水稀释成1000ml,此溶液每ml含有NaNO2 5μg,用时稀释之。