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测定总黄酮含量方法

有货之家 有货之家 发表于2024-11-14 00:04:08 浏览158 评论0

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一 样品溶液的制备

测定总黄酮含量方法

70%乙醇溶液,料液比1﹕8 ,80度下回流2h。 取10g样品放入圆底烧

瓶中加入80ml 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先

离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。

二 芦丁标准品的配置

精密称取芦丁2mg,加无水乙醇定容至10ml。制得浓度为0.2mg/ml芦

丁标准品溶液。

三 显色方法的确定

1 扫描原液 分别取芦丁溶液和样品溶液各1ml,加无水乙醇定容至 25ml,空白对照,全波扫描。

2 硝酸铝显色法 分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml,加5%亚硝酸钠 溶液(1.25g亚硝酸溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液(4,4014g硝酸铝.九水溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀,放置6min,加4%氢氧化钠试液(2g氢氧化钠溶于无水乙醇中定容到50ml容量瓶中)10ml, 再加无水乙醇定容至25ml,摇匀,放置15min, 空白对照,全波扫描 bb 。

3 氯化铝显色法 分别取芦丁对照溶液和样品溶液各5ml ,加1%的氯化铝溶液(1g氯化铝溶于无水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml,摇匀放置10min,空白对照,全波扫描。

4 氢氧化钾显色法 分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml,加3ml10%氢氧化钾溶液(2.5g氢氧化钾溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中),充分摇匀显色5min后,用无水乙醇定容至25ml, 摇匀,空白对照,全波扫描。

四 显色条件的确定

五 标准曲线的绘制

分别取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml芦丁对照品溶液,按所选的显色方法测定

吸光度,绘制标准曲线。