根据查询标准物质网显示,鸡血藤黄酮提取及含量测定方法如下:
提取方法:黄酮化合物的提取是根据相似相容原理进行的,其过程是黄酮化合物从植物内部向溶剂中转移的传质过程。基于这个原理,天然产物有效成分的提取方法有浸渍法、热回流提取法、超声波提取法等。浸渍法、热回流法等一些传统提取方法,由于仪器设备要求较低,易于推广和转化为工业化生产。提取溶剂的选择,一般是由被提取物的理化性质决定的,对于苷类物质一般可用丙酮、乙醇、甲醇或一些极性比较大的溶剂进行提取,大多数苷元宜用极性较小的溶剂,如高浓度的乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂进行提取。甲醇沸点低、有毒,不符合绿色环保型理念的工业化生产。
测定方法如下:
(1)吸收曲线:准确移取芦丁标准溶液0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0mL于6只25mL容量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠1mL,静置6min,加入10%的硝酸铝1mL,静置6min,加入1mol/L的氢氧化钠溶液10mL,用50%乙醇定容至标线,静置15min,以空白为对照,在200~800nm范围内进行波长扫描。黄酮类物质在510nm处有最大吸收峰。
(2)工作曲线方程:另取芦丁标准溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL于6只25mL容量瓶中,按上述方法定容,得浓度为0,0.00375,0.0075,0.0113,0.0150,0.0188mg/mL的系列标准工作溶液,在510nm处测定吸光度。以吸光度为横坐标(X),以芦丁浓度为纵坐标(Y)进行线性回归,得回归方程为Y=0.0457X–0.0045,线性相关系数r2=0.9987。
(3)样品中黄酮含量测定:准确称取一定量鸡血藤粉末,用乙醇恒温提取3h,将乙醇浸提液用真空水泵抽滤,定容至100mL容量瓶中作为样品。准确移取1mL样品液于25mL容量瓶中,同标准品处理方法,在510nm处测定吸光度,根据回归方程得到黄酮含量。