×

可溶性蛋白质含量的测定

有货之家 有货之家 发表于2024-11-14 00:49:16 浏览846 评论0

抢沙发发表评论

检测原理:

可溶性蛋白质含量的测定

考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blueG-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内(1-1000μg)),蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用于蛋白质的定量测定。

考马斯亮蓝G-250于蛋白质结合反应十分迅速,2min左右即达到平衡。其结合物在室温下1h内保持稳定。此法灵敏度高,易于操作,干扰物质少,是一种比较好的定量法。其缺点是在蛋白质含童很高时线性偏低,且不同来源蛋白质与色素结合状况有一定差异。