bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。
双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
扩展资料:
注意事项:
反应颜色的深浅除了与样品的蛋白质浓度相关外,还与反应的温度有关。如果样品的浓度较高(>50μg/ml),反应温度一般采用37 度。如果样品蛋白质的浓度较低(<50μg),反应的温度为60℃,该温度下,色氨酸、酪氨酸和肽键得到充分氧化,大大提高检测灵敏度。
该方法检测的蛋白质浓度范围20μg-500μg/ml当蛋白浓度<20ug/ml 时,推荐60℃温浴,并将蛋白液:工作液的比例调至1:8 进行测定(增强法)可以检测到5ug/ml。