测定小香槟中的总糖可以采用Fehling试剂法或酶法。
1. Fehling试剂法
步骤:
1)取适量的小香槟样品,加入等体积的水,混合均匀。
2)取10ml稀释液,加入10ml Fehling试剂A和10ml Fehling试剂B,混合均匀。
3)将步骤1的混合液加入步骤2的混合液中,然后放入水浴中加热至沸腾,继续加热5分钟。
4)将混合液冷却后用水稀释至适合分光光度计检测的范围内(常用波长为540nm或580nm)。
5)用蒸馏水做空白对照,然后用光度计测定样品和空白的吸光度。
6)计算总糖含量。根据经验公式计算出小香槟中的总糖含量:
总糖含量(%)=(吸光度样品-吸光度空白)×C×100%/m
其中,C为Fehling试剂的浓度(通常为0.1mol/L),m为样品的质量(g),吸光度为光度计测量所得的结果。
2. 酶法
步骤:
1)取适量的小香槟样品,加入等体积的水,混合均匀。
2)加入适量的酶液(一般为葡萄糖氧化酶或葡萄糖-葡糖酸酶),放置一段时间让酶作用。
3)加入少量酸,使酶活性停止。
4)用蒸馏水稀释样品,然后用分光光度计测定样品的吸光度。
5)根据标准曲线计算总糖含量。根据不同的酶和标准曲线,计算出小香槟中的总糖含量。