邻菲啰啉分光光度法测定铁含量的原理：
在pH=2~9的溶液中，邻二氮菲与2价亚铁离子（Fe2+）发生显色反应，该反应的选择性很高，而且生成的橙红色络合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其溶液在510nm（可见光）有最大吸收峰，利用此显色反应，可以用可见光分光光度法测定微量铁。
邻菲啰啉的性质：
1、邻菲啰啉指示剂可通过将1.485g一水合邻二氮菲和0.695gFeSO4·7H2O溶于100mL水中来配制。用于硫酸高铈滴定铁盐的指示剂。一个相关的配体是红菲绕啉（BPT），4,7-二苯基-1,10-邻二氮菲。
2、邻菲啰啉也可用于烷基锂化合物含量的分析。使样品与少量（约1mg）的邻二氮菲作用，呈深色，再用醇类滴定，直到达到无色的滴定终点。
3、虽然显色反应的适宜pH值范围很宽（pH=2~9），但测定时，通常在pH=5的HAc-NaAc缓冲介质中测定。
