还原糖主要包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖和麦芽糖。这些糖类在糖类中,只要分子中含有游离醛基的单糖或二糖都具有还原性。葡萄糖是活细胞的主要能量来源,也是生物的主要供能物质。自然界中,植物通过光合作用产生葡萄糖,医疗领域也广泛应用。果糖是葡萄糖的同分异构体,存在于水果中,与葡萄糖结合形成蔗糖。纯净的果糖是一种无色晶体,通常为黏稠液体,易溶于水、乙醇和乙醚。半乳糖是某些糖蛋白的重要成分,在奶类或甜菜中存在。乳糖仅存在于哺乳动物乳汁中,可分解为葡萄糖和半乳糖。麦芽糖属于双糖类,由含淀粉酶的麦芽作用于淀粉制得。
还原糖测定法采用直接滴定法。样品经除去蛋白质后,加热条件下直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液,以次甲基蓝作指示剂,根据样品液消耗体积计算还原糖量。试剂包括碱性酒石酸铜甲液、乙液,乙酸锌溶液,亚铁氰化钾溶液,葡萄糖标准溶液,盐酸。仪器有实验室常规仪器、古氏坩埚或G4垂融坩埚。样品处理需将样品捣碎混匀,称取2.5~5g置于250mL容量瓶中,加水摇匀后加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液,静置30min过滤备用。标定碱性酒石酸铜溶液需吸取5.0mL甲液和5.0mL乙液置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠,滴加葡萄糖标准溶液,控制加热至沸,滴加至蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。样品溶液预测和测定步骤类似,但需记录样液消耗体积。结果计算公式为100100025021×××=VmmX,式中X为样品中还原糖含量,m1为10mL碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各5mL)相当于还原糖(以葡萄糖计)的质量,m2为样品质量,V为测定时平均消耗样品溶液体积。精密度要求同一样品两次平行测定值相对差不得超过15%。