pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。
1、定时法
通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。
优点:简单易行,对试剂要求不高。
缺点:难保证测定结果的真实性。
难以确定反应时间段酶促反应是否处于线性期。随着保温时间的延续,酶变性失活加速。
2、连续监测法
又称为动力学法或速率法、连续反应法。在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度。连续监测法根据连续测得的数据,可选择线性期的底物或产物变化速率用于计算酶活力。因此连续监测法测定酶活性比定时法更准确。
3、平衡法
通过测定酶反应开始至反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法,又叫终点法。酶活力也称酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可以用在一定条件下,它所催化的某一化学反应的转化速率来表示,即酶催化的转化速率越快,酶的活力就越高反之,速率越慢,酶的活力就越低。