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葡萄糖旋光度的测定实验报告

有货之家 有货之家 发表于2024-11-14 02:35:41 浏览506 评论0

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实验目的:

葡萄糖旋光度的测定实验报告

1. 理解旋光仪的构造和旋光度的测定原理。

2. 掌握旋光仪的使用方法和比旋光度的计算方法。

预习要求:

理解旋光度的定义。

了解影响旋光度的因素。

理解碳水化合物的变旋光现象。

思考如何保护旋光仪在本实验中的应用。

实验原理:

当一束单一的平面偏振光通过手性物质时,其振动方向会发生改变,光振动面旋转一定的角度,这种现象称为旋光现象。物质使偏振光振动面旋转的性质称为旋光性,具有旋光性的物质称为旋光物质。许多天然有机物都具有旋光性。旋光物质使偏振光振动面旋转时,可以是右旋(顺时针方向)或左旋(逆时针方向),因此旋光物质分为右旋物质和左旋物质。单色光源(通常使用钠光灯)发出的光通过起偏棱镜后成为平面偏振光。偏振光通过旋光性物质时,振动平面旋转一定角度。通过调节检偏镜(也是一个尼可尔棱镜)使偏振光通过,检偏镜旋转的度数显示在刻度盘上,此即样品的实测旋光度α。

仪器和试剂:

旋光仪

洗瓶

胶头滴管

滤纸

蒸馏水

5%葡萄糖溶液

未知浓度的葡萄糖溶液

实验内容:

1. 旋光仪的结构:旋光度可以通过旋光仪测定。旋光仪分为数字自动显示结果的自动旋光仪和目测刻度盘的圆盘旋光仪。

2. 旋光度的测定:

样品溶液的配制:准确称取一定量的样品,在50ml容量瓶中配成溶液。若用纯液体样品直接测试,需确定其相对密度。由于葡萄糖溶液具有变旋光现象,应提前24小时配好溶液。

预热:开启旋光仪电源预热5-10分钟,待发出钠黄光后使用。

调零:测定样品前用蒸馏水调节旋光仪零点。洗净样品管,装入蒸馏水,旋紧螺丝帽盖。调整刻度盘至零点视场,重复调零4-5次取平均值。

测定样品:样品管先用蒸馏水清洗,润洗后装上样品。寻找亮度一致的零度视场,记录读数。

数据记录与处理:记录5%葡萄糖溶液和未知浓度葡萄糖溶液的旋光度,计算未知溶液的浓度。

注意:

实验中要确保样品管 clean 和 free of bubbles。

避免旋光仪的损坏,不要过度旋紧螺丝帽盖。

定期检查旋光仪,确保其准确性和校准。