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蛋白质的测定bradford法是什么

有货之家 有货之家 发表于2024-11-14 02:38:44 浏览553 评论0

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bradford法测定蛋白质含量,也就是考马斯亮蓝法,其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色,最大光吸收在488nm; 当它与蛋白质结合后变为蓝色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。

蛋白质的测定bradford法是什么

蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构,缓冲液组分中有干扰试剂等。

扩展资料:

考马斯亮蓝法该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0.2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。

由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此考马斯亮蓝染色法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,在制作标准曲线时通常选用 g-球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差。