测定多酚氧化酶活性的方法主要有两种,分别是检压法和分光光度法。检压法是基于多酚氧化酶(PPO)的特性,它能催化儿茶素等底物在有氧条件下进行氧化还原反应。依据底物氧化速率与酶浓度和时间的关系,瓦氏呼吸仪通过测量反应过程中耗氧量来估算PPO活性,尽管设备简单,但操作过程复杂,且存在一定的误差。
另一种方法是分光光度法,这种方法利用PPO催化邻苯二酚和D-儿茶素反应生成有色产物,这种产物在460纳米处具有最大的吸收值。吸收值的变化与单位时间内酶的活性成正比,因此可以通过计算得出PPO的活性强度。此方法操作简便,具有较好的重现性,是检压法的一种变种,氧电极法也是利用类似原理,应用广泛。
总的来说,这两种方法各有优缺点,检压法虽然设备简单,但操作复杂,精度较低而分光光度法则操作简便,结果准确,是测定多酚氧化酶活性的常用手段之一。氧电极法作为其相关技术,也被广泛应用于实际研究中。
扩展资料
生物化学与分子生物学名词,编号:EC 1.10.3.1。一类含铜的氧化还原酶,催化邻-苯二酚氧化成邻-苯二醌,也能作用于单酚单加氧酶的底物。