多酚氧化酶活性的测定,如下:
多酚氧化酶(PPO)是一种含铜的氧化酶,主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,它能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化。多酚氧化酶活性的测定主要采用分光光度法和检压法。
分光光度法:分光光度法是一种常用的测定酶活性的方法,它利用底物在特定波长处或一定波长范围内光的吸收,对该底物进行定性和定量分析。
检压法:检压法是一种较简便的测定酶活性的方法,它的基本原理是根据底物的氧化速率与单位酶浓度和单位时间内的耗氧量成正比,用瓦氏呼吸仪测定反应过程中的耗氧量,求得PPO活性的大小。
在实际应用中,多酚氧化酶活性的测定对于了解果蔬的成熟过程,以及研究果蔬的贮藏加工过程中的变化等都具有重要的意义。
知识拓展:
多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO)可催化醌和单宁的合成。醌类参与细胞壁物质的合成及代谢,能与蛋白质等大分子物质形成聚合物,限制病原菌的扩展。病原物侵染可诱导多酚氧化酶活性变化,且与抗病性表达有关。
黄瓜被枯萎病菌侵染后,抗病品种多酚氧化酶活性明显增强(徐建华等,1995)。用赤霉病菌接种后,感病小麦品种穗组织中有抗坏血酸(ascorbicacid)积累,据推测抗坏血酸可能抑制了多酚氧化酶活性而导致植物感病(陈利锋等,1997)。
叶明志等(1996)在研究水稻与白叶枯病和细菌性条斑病的相互关系时发现,感病品种接菌后多酚氧化酶活性下降,而抗病品种保持基本不变或明显增强。