【实验原理】
本实验采用蒽酮比色测定溶性糖含量.糖硫酸作用糠醛,糠醛再与蒽酮作用形绿色络合物,颜色深浅与糖含量关.625 nm波OD值与糖含量比.由于蒽酮试剂与糖反应呈色强度随间变化,故必须反应立即同间内比色.该实验简便,没专性,绝部碳水化合物都能与蒽酮试剂反应,产颜色.
【器材与试剂】
1. 实验仪器光光度计,恒温水浴,电平,烘箱,刻度试管,漏斗
2. 实验试剂性炭,乙醇
葡萄糖标准液:称取已80℃烘箱烘至恒重葡萄糖100
mg,用80%乙醇配制1000 ml溶液,即每ml含糖100
μg标准液
蒽酮试剂:称取1 g
蒽酮,溶解于1000 ml稀硫酸(760 ml相密度1.84浓硫酸用蒸馏水稀释1000
ml)溶液,置于棕色瓶,配置使用.
3. 实验材料植物叶片或种
【实验步骤】
1.
溶性糖提取
植物叶片或种110℃烘箱烘15
min,调至70℃夜.干叶片磨碎称取50 mg品倒入10
ml刻度离管内加入4 ml 80%乙醇,置于80℃水浴断搅拌40
min,离,收集清液,其残渣加2 ml 80%乙醇重复提2,合并清液.清液加10
mg性炭,80℃脱色30 min,80%乙醇定容至10
ml,滤取滤液测定.
2.
绘制标准曲线
取20 ml带塞试管,编号,按表配置系列浓度标准葡萄糖溶液.每试管加入5
ml蒽酮试剂,混匀,盖塞,沸水浴煮沸10
min(水浴重沸计),取,立即用水冷却至室温,625nm波,别测量各管光密度值,用0号管调零.光密度纵坐标,葡萄糖含量横坐标,绘制标准曲线.