邻二氮菲分光光度法测定微量铁如下：
邻二氮菲是一种有机配位剂，可与Fe2+离子形成红色配位离子。
在pH=3~9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×10-4，反应十分灵敏，Fe2+离子浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用的 pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液剂样品溶液的酸度;采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+离子并防止测定过程中Fe2+离子被空气氧化。
实验注意事项：
不能颠倒各种试剂的加入顺序。
读数据时要注意A和T所对应的数据。透射比与吸光度的关系为:A=log(I0/I)= log(1/T)测定条件指：测定波长和参比溶液的选择。
最佳波长选择好后不要再改变。
每次测定前要注意调满刻度。
