(一)制作对—硝基苯酚(pNP)标准曲线
按下表分别取不同体积的对—硝基苯酚(4mM)，用50mM醋酸缓冲溶液(pH5.6)稀释成一系列浓度。然后在分光光度计上测定λ=410nm处的光密度，以浓度为横坐标，光密度为纵坐标作曲线。
(二)α-葡萄糖苷酶活力测定
取 0.8mL对—硝基苯酚α-D-葡萄糖苷(pNPG)(1.25mM)，加入 0.2mL大曲浸提液，迅速混匀后于40℃水浴中保温10分钟，取出并立即加入2mL 1 M的碳酸钠溶液终止反应，用分光光度计测定λ=410nm处的光密度，在标准曲线上查出相当于对—硝基苯酚的量，并计算酶活力。酶活力单位定义为：在上述分析条件下每分钟催化形成一个微摩尔pNP所需要的酶量为一个活力单位。
五、计算
V—酶液量mL
n:—酶液稀释倍数
t—反应时间(min)
