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蛋白质纯度的测定方法有哪些

有货之家 有货之家 发表于2024-11-14 03:45:02 浏览548 评论0

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超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量.

蛋白质纯度的测定方法有哪些

含量测定方法很多:

凯氏定氮:灵敏度低,适用于0.2~ 1.0mg氮,误差为 ±2%,干扰少,费时8小时

双缩脲法(Biuret法):灵敏度低1~20mg,中速20~30分钟

紫外吸收法:较为灵敏50~100mg,快速5~10分钟

Folin-酚试剂法(Lowry法):灵敏度高 ~5mg,40~60分钟,操作要严格计时颜色深浅随不同蛋白质变化

考马斯亮蓝法(Bradford法):灵敏度最高1~5mg,5~15分钟,常用

分子量测定:

SDS-PAGE:还原SDS测定结果比较接IC-MS,价格适中,常用

高效凝胶过滤色谱:标准蛋白质和待测蛋白质形状一致时,准确高,差别越大越不准确

电喷雾离子化质谱:最准确

等电点测定:在不同pH条件下测量蛋白质的电泳迁移率,然后用迁移率对pH作图,对应于迁移率为零的pH就是蛋白质的等电点。