1. 试剂与样品的准备
准备DPPH溶液、实验用样品(例如植物提取物或其他抗氧化剂),并选定适当的溶剂以便配制溶液。确保所有试剂均处于有效期内,且样品的状态适宜进行实验。
2. 样品的溶解与处理
将实验样品精确称量后,加入到选定的溶剂中,通过搅拌或超声波处理直至样品完全溶解,制备成预定的浓度。记录样品的溶解体积或质量。
3. DPPH溶液的制备
按照实验要求,将DPPH粉末溶解在无水乙醇等有机溶剂中,制成标准浓度的DPPH工作液。确保溶液在避光条件下保存,以保持其稳定性和活性。
4. 实验操作步骤
在适宜的比色皿中加入一定量的DPPH工作液,随后加入等体积的样品溶液。立即混匀,并在517nm波长下测定吸光度,记录初始吸光值。
5. 吸光度的测定与数据分析
通过比较样品加入前后DPPH溶液的吸光度变化,计算样品对DPPH自由基的清除率。利用自由基清除率评估样品的抗氧化能力。
6. 结果解读与应用
根据实验数据,可以判断样品是否具有抗氧化性,并可比较不同样品的抗氧化能力。DPPH法因其简便、快速等优点,在多个领域得到了广泛应用。
在执行以上步骤时,请注意实验安全,正确处理废弃物,并严格遵守实验室操作规程。实验过程中可能需要根据具体情况进行适当调整。如有疑问,应参考专业文献或咨询专业人士。