牛奶中蛋白质含量的测定凯氏定氮法方法如下：
1、消化：准确量取牛奶0.5mL，移入干燥的凯氏烧瓶中（勿粘附在瓶壁上），加入0.2g硫酸铜、0.3g硫酸钾、10mL浓硫酸，小心摇匀，于通风橱内消化（先小火，待炭化完全后，加大火力至溶液呈蓝绿色），冷却至室温，定容至25mL。同时消化一份空白试剂为对照。
2、蒸馏、吸收：取40mL硼酸溶液于锥形瓶中，加2d混合指示剂，置于冷凝管下端，为接受瓶。量取5mL样品消化液由加料口加入反应室，用5mL蒸馏水冲洗加料口，再加入40%NaOH10mL。
不要摇动，立即封口。夹紧缓冲管下口，开始蒸馏，当接收瓶溶液颜色变化时，继续蒸馏3-5min，下降接收瓶，使硼酸液面离开冷凝管口，继续蒸馏1min，用蒸馏水淋洗浸入硼酸的管外壁，移出接收瓶，滴定。
3、滴定：用0.01mol/L的盐酸标准溶液滴定接收瓶内的反应液。同时做空白对照。
凯氏定氮法测定牛奶中蛋白质含量的缺点：
在凯氏定氮法中，样品首先经过酸化和加热处理，使有机氮转化为无机氮。然后，样品中的氮以硝酸盐的形式存在，通过还原反应转化为氨。最后，使用盐酸和铁盐反应生成氨铁离子，通过滴定的方式测定氨的含量，从而计算出样品中的总氮含量。
然而，凯氏定氮法无法区分蛋白质氮和非蛋白有机氮。在样品中，除了蛋白质氮外，还可能存在其他有机化合物，如氨基酸、胺类化合物等，它们也会被凯氏定氮法计算为总氮含量。
