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如何测定一种生物的全基因序列

有货之家 有货之家 发表于2024-11-14 04:36:09 浏览705 评论0

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如何测定一种生物的全基因序列

自己想做原理到是有,1.提取基因组2.用限制性多态性标记或者是其他分子标记(小卫星,微卫星)3.跑电泳4将条带提取了,克隆到载体上转入菌体表达构成文库。到这步就是为了扩增你酶切了整个基因组的片段以供后续的组装用5.提取上述扩增的片段,将一个作为起始的片段进行步移法和其他的片段进行杂交,(重叠部分杂交),原理简单,操作繁琐,6.分别对文库内所有的小片段测序,脱氧核苷酸终止法,或者荧光检测发等7.测出的小片段序列和5中的步移法图结合就可以写出正确顺序的整个基因组的序列,这是个大工程,非常麻烦,文库一般要做两个,一个大的一个小的,防止漏掉片段,切割打碎后连接转入菌体也不能丢失片段,要不测出的肯定有疏漏,这只是一些原理,了解就行了,真正的做研究考虑效率还是直接花钱测吧