海藻糖酶尿液中的测定方法主要分为两大类：酶活性的测定与酶含量的测定。
酶活性的测定原理基于海藻糖酶的水解作用：它能将一分子的海藻糖分解为两分子的葡萄糖。通过测定生成的葡萄糖浓度，我们可以间接地了解海藻糖酶的活性浓度。具体步骤包括将尿液标本通过平衡的Sephadex G-25柱除去内源性葡萄糖，调整体积至1.5ml，并在37℃的温度下与海藻糖混合反应120分钟后，用POD-GOD方法测定生成的葡萄糖量，以此来计算每小时每升尿液中释放的umol葡萄糖量作为海藻糖酶的活性浓度。
酶含量的测定则使用抗海藻糖酶单克隆抗体的夹心ELISA方法。首先通过制备抗人海藻糖酶的单克隆抗体并经过包被、封闭等步骤，然后用夹心ELISA方法测定出酶蛋白的浓度。结果显示，健康组尿海藻糖酶蛋白的浓度为466±343ng/g肌酐-1。
研究还发现，尿海藻糖酶活性和含量之间存在正相关（p<0.01，r=0.15），并且这些数值与性别和年龄无关。然而，正常人尿液中海藻糖酶活性很低，且尿液中酶活性的测定结果可能不能准确反映真实的酶浓度。
值得注意的是，急性肾衰患者尿液中存在75kDa和30kDa酶蛋白分子，其中30kDa酶蛋白分子可能是完整海藻糖酶在蛋白水解酶作用下的产物。尽管尿液中存在75kDa酶蛋白分子，但该患者的尿海藻糖酶活性并未升高，表明尿液中酶活性已经丧失。由于经典测酶活性方法的影响因素多且灵敏度和特异性不及免疫学方法测定酶质量，因此，尿海藻糖酶的定量测定较传统的酶活性测定更为准确和可靠。
扩展资料
海藻糖酶一种催化海藻糖水解的酶，在工业和医学方面有重要作用．
