采用高效液相色谱法,依据《中国药典2000年版一部附录Ⅰ D》进行苦参疱疹酊含量测定。色谱条件如下:
填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶流动相由乙腈-0.025mol/L硫酸铵-十二烷基硫酸钠(32:68:0.6g)组成,需调整pH值至3.0,使用10%硫酸溶液。检测波长设定为205nm,苦参碱峰的理论板数应不低于2000个。
对照品溶液的制备步骤是:取适量已用五氧化二磷减压干燥至恒重的苦参碱对照品,精确称量后,用甲醇溶解,配制成每毫升含有30μg苦参碱的溶液。
供试品溶液的制备包括:取2ml本品,放入烧杯中,加入浓氨试液2滴,随后加入氯仿-甲醇(7:3)混合溶液5ml,充分搅拌静置,通过装有9g中性氧化铝柱(内径1.2~1.5cm,干法装柱),使用氯仿-甲醇混合溶液50ml分次洗涤烧杯。洗涤液收集后,经70℃水浴蒸发,残渣用适量甲醇溶解,移至25ml量瓶,加足甲醇至刻度,摇匀,过滤后得到溶液。
测定方法为:取对照品和供试品溶液各10μl,分别注入液相色谱仪,进行测定,以计算苦参碱的含量。每1ml的本品中,苦参碱(C15H24N2O)含量不得低于60μg。