荧光量子产率一般采用参比法测定。即在相同激发条件下，分别测定待测荧光试样和已知量子产率的参比荧光标准物质两种稀溶液的积分荧光强度（即校正荧光光谱所包括的面积）以及对一相同激发波长的入射光（紫外-可见光）的吸光度，再将这些值分别代入特定公式进行计算，就可获得待测荧光试样的量子产率： Yu = Ys ·Fu/Fs · As/AuYu、Ys —待测物质和参比标准物质的荧光量子产率 Fu、Fs —为待测物质和参比物质的积分荧光强度 Au、As —为待测物质和参比物质在该激发波长的入射光的吸光度（A=εbc）。 运用此公式时一般要求吸光度As、Au低于0.05。参比标准样最好选择其激发波长值相近的荧光物质。有分析应用价值的荧光化合物的Yu一般常在0.1-1之间。
