1.检测方法
1.1.原理:铵离子或氨基与中性甲醛起反应,生成酸或羧酸,用氢氧化钠溶液滴定。
1.2.试剂:18%中性甲醛溶液,0.1%甲基红指示剂,0.5%酚酞指示剂,0.1mol/l盐酸0.03569mol/L氢氧化钠标准溶液。
1.3.仪器及器具:250ml锥形瓶,5ml吸量管,25ml碱式滴定管,定量加液器,50ml量筒, 漏斗,试管。
1.4.操作:取发酵液过滤,精密量取滤液2.50ml至250ml锥形瓶中,加入20ml蒸馏水,摇匀,加甲基红指示剂2-3滴,用0.1mol/l盐酸调至红色,放置3分钟,用0.03569mol/L氢氧化钠溶滴定液调至黄色。用定量加液器向锥形瓶内加入5.0ml中性甲醛,摇匀放置5分钟,再加入3滴酚酞指示剂,用标准氢氧化钠滴定至微红色即为终点,记录所消耗标准氢氧化钠溶液的体积。 1.5.计算:
M×V1×m×100 0.03569×V1×14×100
氨基氮含量(以氮计,mg/100ml)= ────────── = ─────────────≈20V1
V2 2.5
式中: M:氢氧化钠滴定溶液浓度, V1:滴定时消耗氢氧化钠滴定溶液的体积,ml;
V2:被测样品的体积,ml; m:氮原子摩尔质量,14mg/mmol。
1.6.注意事项
标准氢氧化钠溶液使用期限不得超过两月。