氧化酶试验是基于氧化酶的细菌特性进行的一种检测方法。该试验通过使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成的醌类化合物具有颜色。试验结果与细胞色素C的存在相关。
试验方法包括菌落法、滤纸法和试剂纸片法。其中，菌落法直接将试剂滴加到被检测菌落上滤纸法则利用一小块洁净滤纸，蘸取少量菌液，然后加入试剂试剂纸片法则先将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片，然后将菌液涂于纸片上。
试验结果在菌与试剂接触10秒内呈现深紫色为阳性，无色为阴性。为确保结果准确性，通常以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性及阴性对照。
氧化酶试验主要用于肠杆菌科细菌和假单胞菌属的鉴别，前者表现为阴性，后者则为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌同样呈阳性反应。
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