琼脂扩散试验是一种通过观察抗原与抗体在半固体琼脂中的扩散和结合,以分析和鉴定标本中抗原或抗体成分及效价的生物化学方法。主要分为双向琼脂扩散和单向琼脂扩散两种类型。
双向扩散试验中,抗原和抗体分别在琼脂板的对应孔中加入,两者向四周扩散。如果浓度匹配,会在两者之间形成清晰的沉淀线。沉淀线的数目和融合情况可以揭示抗原的特异性及抗血清的复杂性。单向扩散试验则用于定量测定,通过在琼脂内加入抗体,再加样抗原,形成沉淀环,环的大小与抗原含量和扩散时间有关,可用于测定血清中免疫球蛋白和补体的含量。
具体操作中,需要准备相关的材料如血清、琼脂粉、载玻片等,按照特定步骤进行琼脂板制备、样品加样、扩散观察和结果分析,包括绘制标准曲线来计算未知样本的抗原含量。每种试验都有其独特的材料和方法,但共同点是通过观察沉淀现象来获取免疫学信息。