药物敏感试验是评估细菌对不同抗菌药物敏感性的重要方法。其结果受多种因素影响,其中培养基、细菌接种量、药物浓度以及培养时间是关键要素。
首先,培养基的选择至关重要。应根据试验菌的营养需求精心配制,确保培养基厚度适宜(约5-6mm),避免太薄。通常,90mm直径的培养皿中应倾注18-20ml培养基。同时,应尽量避免培养基中存在抗菌药物的拮抗物质,如钙、镁离子会降低氨基糖苷类药物的活性胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸(PABA)会对抗生素磺胺药和TMP产生抑制作用。
其次,细菌接种量的控制对于获得准确结果至关重要。接种量应保持恒定,过多的细菌可能导致抑菌圈变小,甚至被产酶菌株破坏药物的抗菌活性。
药物浓度和总量直接影响抑菌试验结果。药物浓度需精确配制,严格按照商品药推荐治疗量进行。这确保了实验结果的可靠性和可重复性。
培养时间也是影响结果的重要因素。通常,培养应在37℃条件下进行8-18小时。对于扩散速度慢的抗菌药如多粘菌素,可以通过预先将平板在4℃冰箱中放置2-4小时,使抗菌药预扩散,然后再转移至37℃温箱培养。这样可以有效推迟细菌生长,从而获得更大的抑菌圈。
综上所述,药物敏感试验结果受到培养基配制、细菌接种量、药物浓度和培养时间等多种因素的影响。确保这些条件的精确控制对于获得准确、可靠的结果至关重要。