抑菌试验琼脂稀释法是一种通过测定不同浓度抗菌药物对细菌生长抑制能力的实验方法。
步骤一：培养基制备
使用MH琼脂，调整pH值在7.2~7.4范围内，淋病奈瑟菌使用GC琼脂基础加1%添加剂，链球菌则采用含5%（V/V）绵羊血的MH琼脂（磺胺药试验时，用马血溶解）。
步骤二：含药琼脂平板制备
根据实验设计，将抗菌药物按1:9比例稀释到不同浓度，加入预热并冷却至45~50℃的MH琼脂中，充分混合后倒入灭菌平皿，确保琼脂厚度在3~4mm。平板需密封存储于2~8℃冰箱，可保存5天。
步骤三：接种物制备与接种
制备菌悬液，104CFU的菌液通过多点接种器接种在琼脂平板上，形成5~8mm的菌斑。接种后在适宜温度下孵育，如奈瑟菌属和链球菌属在35℃，甲氧西林耐药葡萄球菌和万古霉素耐药肠球菌需24小时，幽门螺杆菌需微需氧环境。
结果判断
观察平板，判断最低药物浓度抑制细菌生长的点，轻度生长在含甲氧苄胺嘧啶或磺胺的平板上被视为终点浓度，超过此浓度即表明抑制效果降低。若出现异常生长情况，需检查培养物纯度或重复试验。
扩展资料
用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验称为抑菌试验。通过抑菌实验，可以测定一个药物的最低抑菌浓度，用以评价该药物的抑菌性能，这是抗菌药物的最基本的药效学数据。主要方法有进行定性测定的扩散法（如抑菌斑试验）和进行定量测定的稀释法（如最低抑菌浓度实验）。
