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吸收放散试验的放散试验

有货之家 有货之家 发表于2024-11-14 14:00:21 浏览649 评论0

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放散液 用放散试验技术将大量附着于红细胞上的抗体放散到小量的生理盐水中,这种含有抗体的溶液称为放散液。放散液中的抗体具有特异性,可以与相应抗原结合,从而可以进一步确定抗体的特异性。 主要应用ABO 血型系统新生儿溶血病及从红细胞上洗脱掉IgM及IgG抗体。此方法制备抗体最容易,但抗体回收较差,即如果抗体较弱,放散试验可得到假阴性的结果。其优点是适用于一般化验室,缺点是放散液中含有较多游离白蛋白。

吸收放散试验的放散试验

热放散试验方法

将疑有抗体包被的红细胞用生理盐水洗涤3-4次,最后一次尽量压积红细胞和吸取红细胞上层的生理盐水。在压积红细胞中加等量生理盐水(也可用AB血清或6%白蛋白),置56℃水浴箱中7~8分钟,期间摇动数次。取出后立即高速离心。3000 转/分2分钟取上清液(樱红色的上清液即为放散液),与已知红细胞试验。按不同试验要求做试验,将放散液作为抗体使用。

热放散试验注意事项

鉴定放散液应与原抗原抗体反应方法相同,如抗体较弱,可用酶处理红细胞做试验。放散液用生理盐水制备不稳定,若要保存放散液,用AB血清进行放散,受检血清与吸收用红细胞比例要高一些,若抗体弱,可以充分与红细胞结合热放散温度要准确,如温度降低,放散出的抗体又会重新与抗原结合放散抗体时,应不断摇动,促使抗体从抗原抗体复合物上分离下来。 取经洗涤3次的受检压积红细胞1份,加1份生理盐水,2份乙醚,用木塞盖紧,颠倒试管,用力振摇1~2分钟,然后以3000转/分离心5分钟,离心后分成3层,上层是乙醚,中层是红细胞基质,下层是具有抗体的放散液(为樱红色或深红色) 用吸管插入试管底部吸出放散液,若有浑浊可重新离心1次,将放散液置37℃水浴10分钟,除尽乙醚,然后与一组谱红细胞做间接抗球蛋白试验,以鉴定抗体特异性。

酸放散 可用于鉴定新生儿溶血病患儿红细胞上的抗体在溶血性贫血和可疑输血反应中,用来鉴定产生直抗阳性的红细胞制备少量的单特异性抗体从病人红细胞上去除抗体制备可用于自身吸收或鉴定血型及交叉配血次测试验中使用的红细胞。