在进行热放散试验时,需要确保反应方法与原抗原抗体检测一致。如果抗体强度较弱,可以考虑使用酶处理红细胞作为试验放散液。放散液的制备需谨慎,使用生理盐水时,为保持稳定性,可能需要使用AB血清进行保存。在操作中,血清与红细胞的比例应适当,以充分结合。放散过程需精确控制温度,避免因温度过低导致抗体重新结合。试验时应不断摇动,以促使抗体从抗原抗体复合物中分离出来。
乙醚放散试验主要应用于温自身抗体(IgG)或同种抗体引起的直抗阳性检测,以及分离混合物中的IgG抗体。该方法具有检查乙醚化学结构的独特优点,特别适用于获得性溶血性贫血的鉴定,Rh抗体的鉴定效果最佳,但不适用于ABO抗体的鉴定。具体步骤如下:取洗涤过的红细胞,加入生理盐水和乙醚,颠倒振摇后离心,分层后吸出放散液。如有浑浊,需重新离心。将放散液置于37℃水浴中去除乙醚,然后进行间接抗球蛋白试验,以确认抗体的特异性。
扩展资料
吸收试验(absorption test)抗原与抗体的结合是特异性的,因此具有抗体活性的血清加入相应抗原后,抗体的活性下降或消失,这种作用称为吸收试验,对一未知抗体可以用已知抗原进行吸收,吸收后抗体活性下降或消失,说明未知抗体中含有与已知抗原相对应的抗体。有时被检血清中有多种抗体,可用已知抗原分别吸收及鉴定抗体的性质。放散试验的原理是抗原与抗体的结合是可逆的,在物理条件改变时,抗体又会从抗原抗体复合物上分离下来,将抗体由抗原抗体复合物上分离下来的试验称为放散试验。